Hvordan unngå vanlige misforståelser ved bruk av lavbindende pipettspisser?

Lavbindende pipettspisser kan redusere prøvestrestene betydelig på grunn av deres hydrofobe indre overflatedesign, og er spesielt egnet for håndtering av dyre reagenser, viskøse væsker eller sporprøver (så som proteiner og nukleinsyrer). Imidlertid, hvis de ikke drives ordentlig, kan de fortsatt påvirke nøyaktigheten og repeterbarheten til eksperimentet. Følgende er en analyse av vanlige feil og løsninger som er i bruk i kombinasjon med laboratorieoperasjonsspesifikasjoner:

Misforståelse 1: ignorerer spissen før skylling

Feil drift: Aspirer prøven direkte og utelater trinnet før skylling.

Effekt: Selv om lavbindende pipettspisser kan redusere rester, for prøver som serum, protein eller organiske løsningsmidler, kan deres indre vegger fremdeles danne en mikro-væske-film på grunn av overflatespenning, noe som resulterer i et lavt innledende pipetteringsvolum.

Riktig tilnærming: Før formell pipettering, gjenta aspirasjonsutladningen 2 til 3 ganger med samme prøve for å danne et stabilt flytende filmlag på spissenes indre vegg (bortsett fra høye temperatur/lavtemperaturvæsker).

Misforståelse 2: Aspirasjonshastigheten er for rask, eller vinkelen er vippet

Feil drift: Aspirer væsken raskt, eller pipetten vippes mer enn 20 °.
Påvirkning:

Pipette for fort: bobler eller ryggsug (væske suser inn i pipetten og forurenser stempelet);
Pipette vippet: Endrer det flytende overflatetrykket, noe som resulterer i unøyaktig pipetteringsvolum og økt restvolum. Riktig tilnærming:
Pipette sakte og slipp sakte: opererer med konstant hastighet og kontroller stempelfrigjøringshastigheten;
Hold vertikalt: Hold vippevinkelen ≤20 ° når pipettspissen er nedsenket i væskeoverflaten.
Misforståelse 3: Å ignorere de operasjonelle forskjellene i tyktflytende væsker
Feil drift: Bruk den samme pipetteringshastigheten som vanlige væsker for prøver med høy viskositet (for eksempel glyserol og cellesuspensjoner).
Effekt: Viskøse væsker strømmer sakte på pipettspissen, og rask utslipp vil føre til en betydelig økning i gjenværende volum, og motregne fordelene med lav adsorpsjonsdesign.
Riktig tilnærming:

Utvid nedsenkningstiden: Hold deg i væskeoverflaten i 1 sekund etter at du har aspirert før du fjerner den, og pause i 1 sekund før du trykker på det andre giret for å blåse væsken når du slipper ut;
Velg et pipettspiss med bred munn: For makromolekyler eller celleprøver, bruk en bred munn med lav adsorpsjonspipett (70% større enn standardåpningen) for å redusere skjærkraften.
Misoppfatning 4: Å slå hardt når du installerer spissen
Feil drift: Treffer gjentatte ganger pipetthåndtaket for å "stramme" spissen.
Effekt: Langvarig innvirkning vil bruke pipettforseglingskomponenter, ødelegge lufttettheten og forårsake lekkasje eller volumfeil.
Riktig metode: Sett pipetten vertikalt i spissen, trykk lett og roter til venstre og høyre for å passe litt.

Misoppfatning 5: Feil lagring eller gjenbruk
Feil drift:

Sett pipetten flat når det er gjenværende væske i spissen;
Gjenbruk engangs tips med lav adsorpsjon for å spare kostnader. Påvirkning:
Å sette flat forårsaker tilbakestrømning av væske for å korrodere stempelfjæren;
Gjenbruk kan påvirke nøyaktigheten på grunn av kryssforurensning eller strukturell deformasjon. Riktig metode:
Kast spissen umiddelbart etter pipettering, og heng pipetten vertikalt;
Gjenbruk er strengt forbudt, spesielt når det gjelder sensitive eksperimenter som PCR og isotoper.
Profesjonell rådgivning: Maksimer fordelene med tips med lavt opphold
Match væskens egenskaper:
Flyktige væsker (for eksempel kloroform): Unngå å bruke vanlige tips med lavt opphold og bruk løsemiddesikker tips eller eksterne stempelpipetter designet for flyktige reagenser.
Kalibreringsverifisering:
Vei regelmessig vekten av rent vann pipettert med en analytisk balanse (1 ml = 0,9982g ved 20 ℃) ​​for å bekrefte om det faktiske volumet oppfyller standarden.
SAMMENDRAG: Tips med lavt retensjon Forbedrer nøyaktigheten ved å redusere tapet av prøvetap, men hvis detaljene i operasjonen blir ignorert, kan det fremdeles være kontraproduktivt. Standardisert installasjon, hastighetskontroll, tilpasning til prøvekarakteristikker og streng engangsbruk er grunnlaget for å oppnå høye repeterbarhetseksperimenter.